儀器簡介：
Ettan DIGE熒光差異蛋白表達分析系統(tǒng)在傳統(tǒng)雙向電泳技術的基礎上，結合了多重熒光分析的方法，在同一塊膠上共同分離多個分別由不同熒光標記的樣品，并次引入了內標的概念，極大地提高了結果的準確性，可靠性和重復性。在DIGE技術中，每個蛋白點都有它自己的內標，并且軟件全自動根據(jù)每個蛋白點的內標對其表達量進行校準，保證所檢測到的蛋白豐度變化是真實的。DIGE技術可檢測到樣品間小于10%的蛋白表達差異，統(tǒng)計學可信度達到95%以上。利用Ettan DIGE技術還可以對微量（少到5μg）樣本進行蛋白質組學分析，例如激光捕獲顯微切割（LCM）得到的樣品或者很難獲得的珍貴樣品等.采用DIGE技術，通過對不同類型，不同個體的細胞、組織、或經(jīng)過不同處理和不同生長條件下蛋白質表達差異分析，在研究疾病的分子機理、分子診斷、藥物作用機理、毒理學等方面都有廣泛的應用。尤其是通過對各種疾病組織和正常組織進行比較，可以得到針對特定疾病（例如腫瘤）的一些標記蛋白質，得到的這些蛋白質可以用來作為疾病分子診斷的標記，或為進一步的疾病治療以及藥物開發(fā)提供有價值的信息。 Ettan DIGE是目前蛋白質組學研究中可信度和準確率的技術之一，是已經(jīng)經(jīng)過驗證并且被許多的蛋白質組學研究部門肯定的技術。Ettan DIGE技術已經(jīng)在各種樣品中得到應用，包括人、大鼠、小鼠、真菌、細菌等，主要用于功能蛋白質組學，如各種腫瘤研究，尋找疾病分子標志物，揭示藥物作用的分子機制或毒理學研究等方面。 



技術參數(shù)：
Ettan DIGE系統(tǒng)包括CyDye DIGE熒光標記物，IPGphor II/Ettan DALT電泳系統(tǒng)，Typhoon多功能激光共聚焦掃描儀和DeCyder差異分析軟件。CyDye DIGE熒光標記物專門為Ettan DIGE系統(tǒng)設計，這些熒光標記物是分子量和電荷匹配的，具有信號強，光譜分開，吸收和發(fā)射峰窄等特點。這些特點使不同的CyDye（Cy2, Cy3, Cy5）標記的樣品可以在同一塊膠上共分離，保證所有樣品在完全相同的向和第二向電泳條件下分離，消除實驗的偏差并保證的膠內匹配。利用IPGphor II進行向分離和Ettan DALT垂直電泳儀進行第二向分離，在一塊2-D膠上同時分離多達3個樣品。Typhoon的光學系統(tǒng)經(jīng)過優(yōu)化，在Ettan DIGE系統(tǒng)的CyDye DIGE熒光標記蛋白成像中能達到高靈敏度，并且其控制軟件經(jīng)過優(yōu)化設計采集Ettan DIGE圖像。全自動多色熒光掃描功能可以檢測多個樣品并做到四色熒光成像，既保證了分析準確性又提高了通量。另外，Typhoon除了能檢測范圍廣泛的熒光素外，還有經(jīng)過驗證的磷屏同位素檢測和直接化學發(fā)光成像功能。特別開發(fā)的軟件DeCyder完全自動化進行DIGE結果的多重樣品間的差異比較，并通過內標對每個蛋白點和每個差異進行統(tǒng)計學分析。該軟件全自動定位和分析在一塊膠中的多重樣品，并進行多塊膠之間的比較分析，得到的蛋白豐度差異變化的計算結果。利用DeCyder軟件可以得到統(tǒng)計學可信的結果，極大降低操作者之間的偏差，并且將手工操作時間減少到幾分鐘

主要特點：
特點：
1.Ettan DIGE 是一套完整的系統(tǒng)，用于檢測蛋白表達中真實的生物學差異，并對差異進行定量。
2.DIGE技術結合了蛋白質組學研究中經(jīng)典的雙向電泳技術和特有的多重熒光分析技術。
3.不同的樣品分別由電荷和分子量匹配的CyDyeTM DIGE熒光標記物預標記，隨后再混合并在同一塊膠上跑電泳。
4.常規(guī)檢測到小于10%的蛋白表達差異而統(tǒng)計學可信度達到95%。