性能參數(shù)

產(chǎn)品名稱：小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格： 48T/96T

產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國

品牌商標： RD/TSZ

價    格：（具體優(yōu)惠價格請咨詢業(yè)務員）

適用物種： 動物

供貨數(shù)量:  150

小起訂： 1盒

應用范圍： 科研Elisa檢測

詳細資料： 實驗方法技術資料

誠信指數(shù)：129點

供貨所在地：上海

發(fā)貨期限：至買家付款后1-2天發(fā)貨，部分期貨需要貨期4周

了解更多：進入公司展臺

使用范圍：限科研使用，不能應用于

小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒結果計算：

在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線。標準品的濃度為X軸，相應的OD值為Y軸，用四參數(shù)或對數(shù)-對數(shù)法繪制合適的標準曲線。濃度與OD值成反比關系，隨著標準品濃度的增加，黃色強度就減少，即OD值減少樣本濃度可直接從標準曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋，則試劑盒后結果應乘以相應的稀釋因子標準曲線為逆向S型曲線。

附：采用全自動酶標儀檢測，檢測前設置好酶標儀的相關參數(shù)，如坐標參數(shù)（線性，半對數(shù)）和計算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程），即可直接得到結果。

產(chǎn)品名稱存放：收到貨后貯存于4℃，盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內密封起來，貯存于4℃，已稀釋的標準品，生物標記物，體和HRP貯存于4℃。

試劑的準備 

按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑. ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的.自配的緩沖液應用pH計測量較正.從冰箱中取出的試 驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存. 

小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒的準備之洗滌

洗滌在 ELISA 過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相原或體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而

在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA 操作中，洗滌是主要的關鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。

洗滌的方式除某些 ELISA 儀器配有的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：

(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內反應液；b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2 分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短；d.吸干孔內液體。吸干應徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復操作c 和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質與固相載體的結合，并借助于親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回復到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20，其濃度可在0.05%-0.2%

之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的原或體解吸附而減低試驗的靈敏度。

(2)流水沖洗式流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌，洗滌液為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續(xù)沖洗 2 分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為徹底，且也簡便、快速。

已有，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法水流量或水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

“小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒”試劑的準備之顯色

顯色是 ELISA 中的后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在時間內，陰性孔可保持無色，而陽性孔則間的延長而呈色加強。適當溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中，加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。

OPD 底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30 分鐘后即加深，再延長反應時間，可使本底值增高。

OPD 底物液受光照會自行變色，顯色反應應避光進行，顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD 產(chǎn)物用終止后，顯色由橙黃色轉向棕黃色。

T 受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺上，邊反應觀察結果。但為實驗結果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。T 經(jīng)HRP 作用后，約40 分鐘顯色達，隨即逐漸減弱，至2 小時后即可消退至無色。T 的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24 小時)不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。